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搜索结果: 1-15 共查到克隆鉴定相关记录19条 . 查询时间(0.172 秒)
本发明公开了耐盐相关基因剪切体的克隆鉴定及其应用。本发明首先从耐盐基因中克隆得到两种GhIRE1基因剪切体序列,分别命名为GhIRE1s1和GhIRE1s2,接下来通过构建原核表达载体进行原核表达,获得了GhIRE1s1和GhIRE1s2。为了进一步验证GhIRE1s1和GhIRE1s2的功能,分别构建了转GhIRE1s1拟南芥植株和转GhIRE1s2拟南芥植株,并对其耐逆性进行...
旨在克隆鉴定牦牛lncFAM200B,为探索其在牦牛肌肉和脂肪发育过程中的调控作用奠定基础。以臀肌cDNA为模板,设计特异性引物扩增lncFAM200B全长序列,用在线软件CPC、CPAT对该lncRNA的编码能力进行预测,进一步通过原核表达试验鉴定其编码能力;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对lncFAM200B进行组织表达分析,通过TargetScan 7.1和miRanda预测与ln...
本研究旨在了解牦牛FKBP6基因5′调控区和启动子区特征,为探讨牦牛和犏牛睾丸组织中FKBP6基因差异表达机制提供依据。利用克隆测序获得牦牛FKBP6基因5′调控区序列,采用生物信息学方法分析其序列特征;采用双荧光素酶报告基因系统鉴定牦牛FKBP6 基因核心启动子区,利用生物信息学软件预测与精子发生有关的转录因子结合位点。通过克隆测序和序列拼接获得了1 354 bp的牦牛FKBP6基因5′调控区序...
由福建农林大学和福建省烟科所共同主持完成的国家局重点科技项目“根特异表达启动子的克隆鉴定及抗病基因在烟草根部表达”,获得2012年度中国烟草总公司科技进步奖三等奖。
本研究旨在克隆鉴定鸭TLR4基因的可变剪接体,并对TLR4基因的可变剪接体表达规律进行分析。根据GenBank中鸭TLR4基因的mRNA序列(登录号:JN048668)设计引物,利用RT-PCR扩增鸭CDS区,以获取TLR4可变剪接体;并通过构建雏鸭PolyI:C感染模型,利用qRT-PCR检测TLR4可变剪接体的时空表达变化。结果,获得一种鸭TLR4基因新的可变剪接体(TLR4-b),并鉴定其...
【目的】克隆陆地棉纤维伸长发育相关的基因,并做初步功能验证。【方法】以陆地棉李氏超短纤维突变体Li1li1自交后代野生型li1li1和超短纤维突变体Li1li1开花后4 d的胚珠纤维复合体为探针,通过基因芯片筛选优质材料7235棉纤维伸长、次生壁加厚不同发育时期混合cDNA文库,分离出两个在两种材料中差异表达的cDNA序列。【结果】测序结果表明,两个cDNA均为完整的基因序列,分别命名为GhSAM...
目的:构建编码恶性疟原虫复合多价保护性抗原的基因的重组质粒,为进行基因免疫提供条件。方法:设计一对特异引物P1与P2,采用PCR法扩增获取MSP1中C端19肽基因,纯化后用SalⅠ+XbaⅠ双酶切,把含复合基因PfCMR的重组质粒pWR450-1/PfCMR用EcoRⅠ+SalⅠ双酶切,回收复合基因PfCMR,将MSP119基因与PfCMR基因串联后与经EcoRⅠ+XbaⅠ双酶切的真核表达质粒pc...
【目的】了解家蚕维生素B6关键代谢酶磷酸吡哆醇氧化酶(PNPO)的基因结构。【方法】利用生物信息学原理和PCR方法,克隆出编码家蚕(Bombyx mori)PNPO的cDNA(GenBank登录号:DQ452398);采用T7启动子/T7 RNA聚合酶原核表达系统对cDNA进行体外表达,并通过酶活检测进行表达产物的功能鉴定;依据家蚕基因组数据库信息和得到的cDNA,对家蚕PNPO基因结构进行分析。...
【目的】克隆陆地棉纤维伸长发育相关的基因,并做初步功能验证。【方法】以陆地棉李氏超短纤维突变体Li1li1自交后代野生型li1li1和超短纤维突变体Li1li1开花后4 d的胚珠纤维复合体为探针,通过基因芯片筛选优质材料7235棉纤维伸长、次生壁加厚不同发育时期混合cDNA文库,分离出两个在两种材料中差异表达的cDNA序列。【结果】测序结果表明,两个cDNA均为完整的基因序列,分别命名为GhSAM...
从人肝组织中提取总RNA ,用RT - PCR 方法扩增人细胞色素P450 2C9 的cDNA。以T - A 克隆方法将该基因的cDNA 连接到p GEM - 3Z质粒上,然后通过内切酶图谱分析及部分序列分析加以鉴定,结果显示克隆片段具有人细胞色素P450 2C9 内切酶图谱和核苷酸序列,该片断含5′端和3′端部分非编码区及完整的编码区。最后将该cDNA 片段连接到哺乳动物细胞的表达质粒pREP9...
人宫颈癌Ca Ski细胞IL-24基因的克隆鉴定与真核表达。
克隆和研究猪细胞因子及相关基因,应用建库试剂盒成功构建了猪细胞因子cDNA表达文库。采取健康猪外周血及淋巴结,分离单个核细胞,经LPS+PHA联合刺激不同时间后,提取总RNA。将各组样品混合,分离纯化mRNA。反转录合成cDNA第一链和第二链,与EcoRI和HindⅢ接头连接。酶切和过柱分级分离后,与λScreen载体连接,经体外包装转染E.coli ER1647宿主菌,进行文库容量测定和扩增。...
摘要为了探讨神经生长抑制因子(Neuronal growth inhibitory factor, GIF)与Alzheimer's病(Alzheimer's disease,AD)的关系, 将GIF的cDNA全基因克隆到载体pHyblex中,运用酵母双杂交系统从Alzheimer's病人脑cDNA文库中筛选出与GIF相互作用蛋白的cDNA克隆。免疫共沉淀和蛋白质印迹实验进一步验证了该蛋白在体内与...
摘要利用TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)从短小芽孢杆菌基因组中扩增到碱性蛋白酶基因编码区上游的启动子片段。对该片段的序列测定和分析表明, 此片段长797 bp, 但与基因表达有关的序列长约390 bp。对启动子片段进行不同长度的缺失突变, 以获得最小的基因启动子片段, 结果表明, 该基因起始密码子上游约160 bp的DNA片段就可以启动基因的表...

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