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本研究计划构建能同时表达牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）优势抗原基因的重组质粒并研究其免疫效果，旨在为BVD-IBR二联核酸疫苗的研制提供参考。采用PCR扩增目的基因E0及gD并将其依次连接至真核表达载体pVAX1-IRES中，构建pVAX1-E0-IRES-gD重组真核表达载体；将pVAX1-E0-IRES-gD转染至293T细胞中，间接免疫荧光法检测目的基因在细胞...
猪基因共表达网络模块的构建及功能分析
基因共表达网络模块 功能协同性 组织特异性 猪
2018/4/3
旨在构建猪（Sus scrofa）的基因共表达网络模块，挖掘功能基因。基于权重基因共表达网络分析技术（Weighted gene co-expression network analysis，WGCNA），利用猪的多组织转录组测序数据，构建了24个猪的基因共表达模块，并对模块进行生物学过程、KEGG通路、疾病和组织特异性分析。结果显示，模块具有功能特异性，与器官的发育阶段、代谢通路有关，且同一模块...
本研究旨在应用转基因技术制作能特异性分解纤维素和木质素的转基因单胃动物，对于培育高饲料转化率的家畜具有重要的研究意义。利用2A肽策略构建由EF1α启动子驱动的可同时表达3种能够降解纤维素和木质素的酶（EGXA、BGL4和XYNB）的真核表达载体，并通过原核显微注射技术获得同时表达3种酶的转基因小鼠。经检测发现，2A肽能够介导3种酶同时在HEK293A细胞中正常表达。通过酶活分析、Western b...
共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价 1003; 3. 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心
鹅细小病毒(GPV) VP3 鹅白细胞介素-2(IL-2) 乳酸杆菌 共表达 口服免疫 融合蛋白
2013/11/29
笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV) VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌，评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接，并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP，亚克隆到乳酸杆菌整合表达载体pMJ67，电转化入干酪乳杆菌L.CECT5276，SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组菌GPVVP3-gI...
为评价共表达鸡IL6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒（rFPVAIH5AIL6）的免疫抗体消长规律及免疫效力，将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群，结果发现，2种免疫途径中，重组鸡痘病毒对鸡体质量增加均无影响，而野生型鸡痘病毒均可抑制鸡体质量增加。翅部皮下注射疫苗组能够产生较高的血凝抑制（HI）抗体水平，免疫21 d后抗体水平达到高峰，28 d后开始下降...
将干扰素-γ、猪圆环病毒Ⅱ型ORF2主要抗原表位（47—85位AA）和猪细小病毒VP2基因克隆至pCI-neo真核载体中，构建重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2。用脂质体介导法将其转染到MDBK细胞中，利用RTPCR和间接免疫荧光法检测产物的表达情况。将重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2、pCI-ORF2.VP2、对照质粒pCI-neo、PBS、猪细小病毒灭活苗和猪圆环病毒亚...
共表达禽流感病毒HA和NA基因的重组禽痘病毒在SPF鸡的免疫效力试验
禽流感病毒 重组禽痘病毒 免疫效力
2008/9/27
将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)毒株的HA和NA2个基因同源重组到禽痘病毒基因组中,获得了能同时高效表达这2种蛋白的重组禽痘病毒(rFPV-HA-NA)。将rFPV-HA-NA经翅膀刺种途径接种8周龄SPF鸡,免疫后4周分别用10LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)和A/FPV/Rostock/34(...
【目的】探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）自杀性DNA疫苗的免疫效果。【方法】将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游，获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。【结果】Western blot检测证实ORF5和ORF6基因获得正确表达，并且所表达的GP5和M蛋白可以形成异源二聚体。将pSFV-56免疫Balb/c...
猪囊尾蚴病是一种重要的人畜共患病，研制有效、安全、廉价的疫苗是当前主要的研究方向之一。本试验通过PCR方法，从含猪囊尾蚴B抗原（AgB）、猪CD58和猪IFN-γ的重组克隆质粒中扩增出AgB、CD58和IFN-γ基因， 然后将其克隆到真核表达载体pBudCE4.1中。重组表达质粒鉴定后，在脂质体作用下转染BHK-21细胞，通过间接免疫荧光 （IFA）或直接免疫荧光试验分别检测AgB、CD58和IF...
共表达与牛疱疹病毒1型VP22融合的猪繁殖与呼吸综合征病毒E及M蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫原性观察
牛疱疹病毒1型VP22；猪繁殖与呼吸综合征病毒；修饰型ORF5基因；ORF6基因；重组伪狂犬病毒
2008/3/28
为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）基因工程疫苗，以伪狂犬病毒（PRV）gE基因缺失标志疫苗株TK-/gE-/LacZ+为病毒载体，通过同源重组，构建了共表达与牛疱疹病毒1型VP22（BHV-1 VP22）融合的PRRSV E及M蛋白的重组伪狂犬病毒（rPRV）TK-/gE-/VP22E+/VP22M+。经PCR、Southern blot、Western blot证实rPRV构建正确,并...
将共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒（rFPV-IFNγS1）接种4周龄 SPF鸡，免疫3周后用异源病毒LSC99I株攻击，考察重组疫苗对异源病毒攻击的保护作用。结果显示，疫苗接种后，免疫鸡血清中很快出现抗体；外周血中CD4+和CD8+ T淋巴细胞的百分含量略高于非免疫对照组，但这种差异并不显著。LSC99I株IB病毒攻击后的保护率结果表明，免疫组的发病率为50％（5...
将鸡II型干扰素（ChIFNγ）基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中，构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞（CEF），经过8轮蓝斑筛选，得到纯化的能够同时表达鸡II型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγS1。rFPV-ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周...
新城疫病毒F基因与传染性法氏囊病毒VP0基因在鸡痘病毒中共表达
2007/7/28
专著信息
书名
新城疫病毒F基因与传染性法氏囊病毒VP0基因在鸡痘病毒中共表达
语种
中文
撰写或编译
作者
许凌峰,夏志平,郭志儒,王宏,王兴龙,金宁一
第一作者单位
出版社
中国生物制品学杂志,2002,15(5)： 263-265
出版地
出版日期
2002年
月
日
标准书号
介质类型
页数
字数
开本
相关项目
我国鸡新城疫病原生态学和分子流行病学的研究
将鸡II型干扰素（ChIFNγ）基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中，构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞（CEF），经过8轮蓝斑筛选，得到纯化的能够同时表达鸡II型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγS1。rFPV-ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周...