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王晓晨课题组揭示微丝交联蛋白FLN-2调控多囊泡体生成的新机制（图）
磷脂酸 鞘氨醇 多囊泡体 神经酰胺
2022/9/15
内含体是真核细胞内主要的分选细胞器，在调控内吞、合成分泌途径中不同膜性细胞器间的蛋白质脂质转运过程中扮演重要角色。多囊泡体(multivesicular bodies, MVBs)是一类腔内包含囊泡的晚期内含体，其腔内囊泡（intralumenal vesicles, ILVs）的形成伴随着内含体膜上货物分子的富集分选、膜内陷及出芽等膜重塑过程。在细胞内，MVB可与溶酶体融合降解ILV中的货物，调...
【目的】分析微丝和微管蛋白在优雅蝈螽Gampsocleis gratiosa精子形成过程中的作用，为昆虫精子顶体复合体形成和细胞核重建机制研究奠定基础。【方法】应用免疫荧光、PAS-苏木精染色和透射电镜等方法，对优雅蝈螽成虫的精巢、雄性贮精囊和雌性受精囊内精子的发育以及微丝和微管蛋白在精子形成各个时期的分布进行了观察。【结果】精巢中，早期圆形精子细胞中微丝在精子细胞的某区域大量聚集，而微管蛋白随机...
微丝菌(Microthrix parvicella)是世界范围内诱发活性污泥膨胀现象的主要丝状菌之一,它在活性污泥中准确的原位定量解析对污泥膨胀现象及控制策略研究具有非常重要的意义.由于微丝菌自身的特殊生理生化性质(如表面高疏水性及较厚细胞壁)易导致常规荧光原位杂交(FISH)过程中定量结果偏低.本研究针对FISH过程中存在的探针渗透率低、荧光信号偏弱等现象,从活性污泥样品前处理、杂交过程条件等方...
本研究旨在探讨3种冷冻方法（CLV法、OPS法和Straw法）对猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后微丝、脂肪颗粒分布及其超微结构的影响。结果显示：（1）CLV(Cryoloop vitrification)法冷冻速率最高，达42 639 ℃•min-1；（2）CLV法微丝正常分布率（47.06%）最高，显著高于OPS(Open pulled straw)法的38.04%和Straw法的30...
通过对比分析人体外成熟卵母细胞玻璃化冷冻前后的微丝分布和发育潜能，探讨冷冻对卵母细胞发育潜能的影响及相关的细胞学机制。方法 收集人未成熟卵母细胞，体外培养为成熟卵母细胞。获得的成熟卵母细胞随机分为新鲜组和玻璃化冷冻组，分别行受精和免疫荧光染色分析。受精后观察2PN数、囊胚数及优质囊胚数等指标，染色后用激光共聚焦显微镜观察微丝分布形态。结果 玻璃化冷冻复苏后卵母细胞成活率为83.74%。新鲜组2...
分析雪胆素乙(CuⅡb)对人前列腺癌PC-3细胞增殖及细胞周期的影响,探讨其作用机制。方法 MTS法检测CuⅡb 0.064~200 μmol·L-1作用48 h后PC-3细胞增殖;CuⅡ b 2和20 μmol·L-1作用24 h,相差显微镜观察细胞形态;CuⅡ b 2和20 μmol·L-1作用48 h,流式细胞术分析细胞周期分布;免疫荧光染色分析CuⅡ b 20 μmol·L-1分别作用1,...
神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板
运动神经肌肉终板 神经微丝蛋白质类 免疫荧光技术
2011/11/13
目的：了解应用神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板的效果。方法：取SPF级大鼠6只，麻醉状态下取材双侧比目鱼肌神经入肌点组织，以多聚甲醛固定，冰冻切片，行神经微丝蛋白免疫荧光染色，荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察运动终板形态，并用激光共聚焦显微镜软件对运动终板形态进行三维重建。结果：染色切片在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下均可观察到运动终板爪形结构形态，激光共聚焦显微镜采集图像进行三维重建后，...
细胞松弛素B(Cytochalasin B,CB)是一种抑制微丝聚合的药物,能抑制微丝的组装从而阻止胞质分裂和极体排放,是研究细胞分裂器形成与变化的重要药物。在牛卵母细胞体外成熟培养过程中加入7.5 μg/mL的CB进行处理,分析CB对减数分裂过程中细胞骨架形态、染色体的排列与分离等方面的影响。结果显示,CB处理后卵母细胞第一极体的排放受到了抑制,染色体的排列和分离受到了影响,出现了同源染色体分离...
神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板
运动神经肌肉终板 神经微丝蛋白质类 免疫荧光技术
2012/2/9
了解应用神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板的效果。方法：取SPF级大鼠6只，麻醉状态下取材双侧比目鱼肌神经入肌点组织，以多聚甲醛固定，冰冻切片，行神经微丝蛋白免疫荧光染色，荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察运动终板形态，并用激光共聚焦显微镜软件对运动终板形态进行三维重建。
在本实验中我们用优化的免疫荧光化学法结合激光共聚焦显微技术，观察了微丝在小鼠卵细胞不同期的分布情况及PKB/Akt对小鼠卵母细胞和早期胚胎的微丝聚合的影响。结果显示，在小鼠卵母细胞及早期胚胎中均有微丝的表达，且主要集中在纺锤体处的质膜处、极体及分裂沟处。注射激活型PKB/Akt mRNA能够增强微丝的聚集。相反， 注射激酶失活型的PKB/AktmRNA减弱了微丝的聚合。因而我们认为PKB/Akt可...
枯草芽孢杆菌拮抗病原菌对细胞微丝的影响
病原菌 枯草芽孢杆菌 Caco-2细胞 微丝
2013/12/3
本研究旨在探讨枯草芽孢杆菌拮抗2种病原菌（鼠伤寒沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌）对人结肠癌细胞Caco-2细胞中微丝的影响。将枯草芽孢杆菌及上述2种病原菌加到Caco-2细胞上，用异硫氰酸荧光素鬼笔环肽标记细胞微丝，在倒置荧光显微镜下观察细胞微丝的变化；利用Western blotting检测细胞微丝调节蛋白Rac1蛋白的表达变化。结果显示正常Caco-2细胞内微丝呈散在的平行排列；加鼠伤寒沙门氏菌...
小鼠树突细胞成熟前后的形态及其微丝蛋白的适应性改变
树突细胞 脂多糖 细胞骨架 微丝蛋白
2014/3/20
研究树突细胞（DC）成熟前后的形态及其微丝蛋白的适应性变化。方法 经重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4 诱导小鼠骨髓单核细胞为未成熟树突细胞，培养至第6 天时，用脂多糖（LPS）诱导成熟树突细胞（mDC），在倒置相差显微镜和荧光显微镜下观察并前后对比分析细胞在成熟前后的表面突起和内部微丝蛋白的变化。结果 mDC 高表达CD11c、MHC-Ⅱ和CD86。成熟前的DC 体积较小，随着...
目的：探讨人巨细胞病毒（CMV）对人胚成纤维细胞（HF）的感染及其对细胞肌动蛋白基因 （β-actin）mRNA表达水平和微丝的影响。方法： 应用细胞形态学、RT-PCR半定量法、透射电镜观察CMV对HF细胞的感染及感染后细胞β-actin mRNA和微丝的变化。结果： 经CMV作用后，HF细胞形态由梭形变粗、变圆甚至脱壁；HF细胞有CMV即刻早期抗原基因(IE)mRNA表达，且随着CMV滴度的增...