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探讨RNAi沉默酪氨酸激酶受体RON（recepteur d’origine nantais）基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和对抗肿瘤药物敏感性的影响。 方法： 构建RON基因的RNAi慢病毒载体Lv-RON-siRNA。Real-time PCR和Western blotting检测RON基因的沉默效率及RON蛋白表达水平；Transwell侵袭实验和ATP-TCA（ATP-tum...
北柴胡UGT基因的克隆及其过量表达和RNAi转基因载体的构建
北柴胡 UGT基因 转基因载体
2012/3/20
克隆北柴胡中可能参与柴胡皂苷生物合成的UGT基因,构建其过表达和抑制表达的转基因载体,为通过转基因验证其功能奠定基础。 方法: 在454高通量测序已获得部分cDNA序列基础上,通过RACE和LD-PCR方法扩增全长cDNA克隆。设计含有酶切位点的PCR引物,PCR扩增UGT基因的ORF和部分片段后,酶切,分别插入到pCAMBIA-SUPER,1 300和pHANNIBAL中。重组的pHANNIBA...
探讨RNAi（RNA interference）技术抑制乳腺癌MCF 7细胞中AKT1和PI3K P85亚基的表达对MCF 7细胞增殖和侵袭等的影响。方法：将包含AKT1、PI3K P85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA（shRNA）重组腺病毒质粒表达载体rAd5 siAKT1 siPI3K转染至乳腺癌MCF 7细胞。应用real time PCR和Western blotting检测转染后...
一项新试验显示，导致老年人失明的最常见病因——老年性黄斑变性（AMD），能够通过一小段遗传物质来对付。美国费城Acuity制药公司近日公布了评估RNA干扰（RNAi)疗法对人类患者效果的首次临床II期试验的初步结果。