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探讨干扰和转染Runx2基因后对K7M2骨肉瘤细胞体外生物学活性的影响。方法分别将阴性对照质粒、携带Runx2和siRNA Runx2的质粒转染到K7M2细胞中。应用Western blot检测转染和干扰Runx2基因对其蛋白表达的影响，并检测细胞体外的增殖能力(MTT )、侵袭性、迁移性和黏附性的变化，并应用流式细胞仪（FCM）检测相应细胞的凋亡率和细胞周期分布的变化。结果与空白对照组比，转染R...
观察转染微小 RNA-146a（ miR-146a） 对大鼠肺泡巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子 -琢（ TNF-琢）表达的影响，探讨转染 miR-146a 对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用。 方法 体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株 NR8383，分别以 25、50、100?nmol/L?Cy TM 3 标记的 Pre-miR TM 阴性对照转染细胞，选择转染效率最高的浓度作为实验浓度。 将 NR8383 ...
PUMA基因转染乳腺癌MCF-7细胞增强表柔比星致凋亡敏感性的研究
PUMA 基因 乳腺癌 MCF-7 细胞 凋亡
2014/5/23
探讨PUMA 基因转染是否增强乳腺癌MCF-7 细胞对表柔比星致凋亡的敏感性。方法：应用脂质体介导重组真核表达载体PUMA-pCDNA3 和空载体pCDNA3 质粒瞬时转染至乳腺癌MCF-7 细胞中，G418 筛选阳性细胞。将系列浓度（0. 01～100 μmol/L ）的表柔比星分别作用于MCF-7、MCF-7/PUMA 和MCF-7/pCDNA 3 细胞72h，MTT 法测定各组细胞的存活率并...
CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立
CD147 慢病毒载体 转染 增殖
2013/12/4
CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白，可促进肿瘤的浸润和转移。本研究拟构建CD147慢病毒表达载体，建立稳定过表达CD147的人肺腺癌A549细胞系，观察过表达CD147后对MMP-9及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 RT-PCR扩增CD147基因全长序列，将序列插入pEGFP载体，构建pEGFP-CD147慢病毒表达载体，随后转入293FT细胞中进行慢病毒包装，用获得的慢病毒毒液感染人...
观察稳定转染PGRMC1基因的小分子干扰RNA(siRNA)对卵巢癌COC1细胞体外增殖的影响。
双干扰质粒共转染对胃癌BAG-1基因亚型表达的抑制作用
胃癌 BAG-1基因 短发卡RNA 小分子干扰
2013/12/20
构建针对人BAG-1（Bcl-2-associated athanogene 1）基因的短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）真核表达质粒，探讨其对人胃癌SGC-7901细胞BAG-1主要亚型表达的抑制作用及对细胞生长的影响。
目的：携带癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）基因的重组人腺相关病毒（reconstructive human adenoassociation virus, rh-AAV）感染树突状细胞（dendritic cell, DC）诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte,CTL)，体外检测其对CD44+CD24-/low乳腺癌干...
观察Bcl-2shRNA稳定转染联合γ线照射对胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响。方法 构建针对Bcl-2基因的干扰质粒pGPH1/GFP/Neo，经脂质体介导转染SGC7901细胞，G418筛选稳定表达的细胞株，γ线照射后形成4组细胞,分别命名为SGC-7901(A组)、照射/SGC-7901(B组)、Bcl-2shRNA/SGC-7901(C组)、照射/ Bcl-2shRNA/SGC-...
肺癌严重危害人类生命和健康，目前国内外肺癌的发病率和死亡率仍在不断上升。尤其是非小细胞肺癌（non-small cell lung cacer, NSCLC）治疗效果多年来一直没有显著提高。本研究旨在将人甲状腺过氧化物酶（hTPO）基因及人钠碘转运体（hNIS）基因共转入肺癌细胞系后研究其摄碘能力的变化。方法 克隆，重组，包装并扩增纯化得到重组腺病毒（AdTPO），测定病毒滴度，Western b...
转染pCE质粒的干细胞对肝癌治疗的影响
基因治疗 干细胞 肝肿瘤 趋化因子CXCL12
2013/12/30
观察转染pCE质粒的干细胞对肝癌的治疗作用。方法 采用尾静脉直接注射法治疗大鼠肝脏转移瘤，设立阴性对照、干细胞、转染pCE质粒的干细胞组和5-Fu组，通过观察转移瘤在肝脏组织中的生长情况和卫星灶形成，肝脏组织的病理学改变，检测基质衍生因子1(stromal cell derived factor1, SDF -1) 表达，比较4组对肝癌的治疗作用。结果 转染pCE质粒的干细胞组对肿瘤细胞的生长...
IL-27基因转染对树突状细胞表型和功能的影响
白细胞介素27 树突状细胞 细胞培养 免疫活性
2013/12/27
探讨转染IL-27基因体外对人外周血单个核细胞来源树突状细胞表型和功能的影响。方法 采集健康成人外周血，密度梯度离心法获得外周血单个核细胞，用GM-CSF、IL-4诱导树突状细胞（Dendritic cell, DC），第5天后将DC分为3组：IL-27基因转染组、TNF-α组和阴性对照组。倒置显微镜观察DC形态；流式细胞术检测DC表面分子CD1a、CD80、CD83和CD86的表达情况；MTT法...
人突变p27基因转染大肠癌细胞凋亡的实验研究
结直肠肿瘤 基因 p27mt 细胞凋亡
2009/10/27
目的：探讨人突变p27基因对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。 方法： 构建重组腺病毒Ad-p27mt，转染大肠癌细胞SW480，用流式细胞仪、DNA片段分析法、TUNEL法观察Ad-p27mt对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。 结果: 成功构建了Ad-p27mt，在感染复数≥50时，可达100%的转导效率。Ad-p27mt转染SW480 24 h后流式细胞仪检测在G1期前出现了亚二倍体凋亡峰，细胞DNA提取电...
目的：探讨转染人肝癌总RNA的树突状细胞(DC) 疫苗体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用。 方法： 采用原发性肝癌（HCC）病人外周血单核细胞（PBMC），在粒/巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4) 刺激下增殖分化为DC细胞；从人肝癌细胞中体外扩增肝癌RNA。以HCCRNA转染DC细胞，并与PBMC混合培养诱导扩增CTL。MTT法测定CTL的杀瘤活性。 结果...
目的: 探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响. 方法: 根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组，空载体转染组，未转染组.应用PCR检测外源性p15基因，Western blot方法检测转染细胞的P15蛋白变化;流式细胞仪分析细胞周期变化，应用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p15基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响...