搜索结果: 151-165 共查到“知识库 医学遗传学”相关记录1117条 . 查询时间(4.719 秒)
目的：探讨线粒体DNA tRNA Leu (UUR)基因及其相邻的ND1基因8个位点的突变与2型糖尿病的关系。 方法： 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的分析方法，对174例2型糖尿病患者和207名健康对照的mtDNA的3 243、3 256、3 290、3 316、3 394、3 421、3 426、3 460和3 593共9个已报道的突变位点同时进行筛选，并采用测序、...
Ang-1基因修饰的骨髓间质干细胞移植治疗脑梗死的实验研究
骨髓间质干细胞 慢病毒载体 血管生成素-1 脑梗死
2009/8/27
目的： 观察血管生成素－1（Ang-1）和骨髓间质干细胞（MSCs）对脑梗死的联合治疗作用。方法: 构建带有大鼠Ang-1基因的慢病毒载体，感染大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）获得可表达具有生物活性Ang-1蛋白的rMSCs（Ang-rMSCs）。制备大鼠大脑中动脉栓塞模型，随机分为对照组、Ang-rMSCs组及空载体-rMSCs（pNL-rMSCs）组。脑栓塞术后24 h进行细胞移植。各组大鼠分...
目的：研究bHLH家族基因中c-myc和mad1对人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子的转录调节。 方法： 采用脂质体DOTAP转染法将装载有虫荧光素酶基因的野生型hTERT启动子(Tw)和突变型hTERT启动子(Td)质粒，与含c-myc或mad1基因的质粒，以不同方式组合分别转染至膀胱癌T24细胞、EJ细胞、猴肾母COS-7细胞和人成纤维细胞，培养48 h后检测各组虫荧光素酶活性。 结果： 在...
目的： 探讨载体表达的小干扰RNA (siRNA)抑制MDR1基因的表达，并逆转卵巢癌耐药细胞多药耐药的可行性。 方法： 浓度梯度诱导法和人MDR1基因载体转染法建立阿霉素耐药细胞株OVCAR/AR和多药耐药亚株OVCAR/MDR细胞。脂质体介导将MDR1特异性siRNA的表达载体(pSN/mdr1a和pSN/mdr1b)转染耐药细胞，实时定量RT-PCR方法检测MDRl mRNA的表达，流式细胞...
FRNK质粒转染抑制肝星状细胞胶原合成
肝星状细胞 黏着斑激酶相关非激酶 胶原 胶原Ⅰ型
2009/8/27
目的：探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白（FN）刺激的肝星状细胞（HSCs）胶原合成的影响。方法:应用体外细胞培养技术，脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染；采用Western blotting方法测定FRNK蛋白在HSCs的表达，鉴定转染效果；［3H］-Pro掺入法检测HSCs总胶原和Ⅰ型胶原的合成能力。结果:FRNK质粒成功转染HSCs，于转染48 h时FRNK蛋白表达最强（P...
GILZ真核表达载体的构建及其表达定位
糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白 C3H10T1/2细胞 真核表达载体
2009/8/27
目的:克隆、构建HA标签的糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白GILZ表达载体，观察其在细胞中表达与定位，为研究GILZ在脂肪细胞分化中的作用提供工具。 方法：采用逆转录PCR（RT-PCR）法从C3H10T1/2细胞中扩增带有HA标签的GILZ cDNA编码区，并将其重组于真核表达载体pcDNA3中。经酶切、序列鉴定分析后，将该重组质粒通过Lipofectamine 2000脂质体和CaCl2方法，分别...
Hereditary haemochromatosis is an iron-overload disease, which mainly induced by the hemochromatosis gene (HFE) mutation. Proximately 10% the whites have mutations in the HFE gene that has been identi...
目的：构建用于体内剪接分析的人糖皮质激素受体（hGR）小基因真核表达载体。方法:以人基因组DNA为模板,设计特定的引物进行PCR扩增获得3.892 kb长的hGR小基因片段,并将其连入pMD18-TSimple载体中,限制性内切酶酶切鉴定后,再亚克隆到PcDNA3载体中,获得hGR小基因真核表达质粒PcDNA3-hGR并测序验证。Lipofectamine法转染PcDNA3-hGR至HeLa...
目的:本研究旨在应用RNA干扰技术，诱导转基因肺癌细胞HLCDG1基因沉默并观察其对肺癌细胞周期和增殖的影响。 方法:构建HLCDG1基因短小干扰双链RNA表达载体，筛选HLCDG1基因表达沉默的肺癌细胞株并应用MTT和流式细胞仪分析这一肺癌细胞株增殖和细胞周期分布状况。 结果:根据siRNA表达载体的设计原则，构建了能在哺乳动物细胞稳定表达的siRNA载体5个（4个位点匹配实验组和1个位点错配对...
Desmuslin基因的表达下调与原发性下肢静脉功能不全关系的实验研究
静脉 基因 desmuslin 基因表达
2009/8/27
目的：在以前的mRNA差异显示研究中我们发现原发性静脉功能不全患者的病变静脉组织中存在desmuslin基因的差异表达。本研究的目的是从基因的转录和翻译水平对此进行验证。 方法： 将差异显示中获得的cDNA制备成探针，并根据desmuslin mRNA序列合成特异性PCR引物，分别采用Northern blotting和半定量RT-PCR技术检测病变静脉组织中desmuslin的表达水平。同时利用...
目的：观察LPS刺激对CIAS1基因表达的影响 ,初步探讨CIAS1基因在炎症发病机制中的作用。方法：在人全血中加入L PS，用RT-PCR扩增CIAS1基因的NACHT区，观察不同时间及不同浓度LPS刺激对CIAS1 mRNA表 达丰度的影响。结果：100 mg/L LPS刺激对CIAS1 mRNA表达呈现先降低 后升高的模式。不同浓度LPS刺激 2 h，CIAS1 mRNA增高呈剂量依赖性(P...
目的：通过去除N端丝氨酸32/36磷酸化位点，获得人胎盘组织IκBα突变体（IκBαM）基因，构建其复制缺陷型重组腺病毒（AdIκBαM），并进行体外表达和活性检测。方法:PCR定点克隆IκBαM基因（203-1 003 bp），亚克隆至pShuttle和pGEM-T，进行PCR、双酶切、DNA测序和同源性分析。将重组质粒pShuttle-IκBαM中含CMV启动子、IκBαM cDNA和Poly...
目的： 采用表面增强激光解析/电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测心绞痛患者血浆蛋白质指纹图谱，从中筛选出特异的分子标志物。方法: 应用SELDI-TOF-MS技术及金属离子螯合（IMAC-3）蛋白质芯片对20例心绞痛患者和29例正常对照者血浆样本进行检测，借助生物信息学工具（非线性的支持向量机，SVM）提出心绞痛的诊断模型,并运用留一交叉验证法来评估该模型的判别效能。结果: 用S...
STEAP1基因的体外转录
基因 STEAP1 前列腺肿瘤 pSP64载体 前列腺特异6次跨膜上皮抗原
2009/8/26
目的：建立STEAP1基因的体外转录模型，为进一步研究其功能奠定基础。 方法:应用RT-PCR的方法从前列腺癌组织中钓取STEAP1全长cDNA，TA克隆后测序，亚克隆入pSP64载体，构建体外转录用载体STEAP1-pSP64。同时，通过PCR构建具有SP6 RNA聚合酶结合位点的STEAP1体外转录盒。应用体外转录试剂盒，对比STEAP1-pSP64与STEAP1体外转录盒转录效率。结果：（1...