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科学家合作揭示水牛白毛色性状形成分子机制（图）
水牛 白毛色 分子生物学与进化
2020/12/28
近日，中国农业科学院-国际家畜研究所“畜禽牧草遗传资源联合实验室”联合中国农业大学等单位，利用多种组学方法，研究揭示了水牛白毛色性状的致因突变和分子调控机制，为我国白水牛特色遗传资源保护利用提供了重要科学依据。相关研究成果在线发表在《分子生物学与进化（Molecular Biology and Evolution）》上。
本研究旨在探讨不同浓度的组蛋白甲基化抑制剂UNC0638对转基因水牛成纤维细胞外源基因表达水平的影响，为外源基因表达机制研究及提高转基因水牛生产效率提供理论依据。试验首先使用不同浓度的UNC0638（0（对照组）、0.5、1.5、2.5、5.0 μmol·L-1）处理水牛胎儿成纤维细胞（BFFs）8 d，绘制细胞生长曲线，并在UNC0638（0（对照组）、0.5、1.5、2.5 μmol·L-1）...
旨在鉴定分析水牛乳腺泌乳期和非泌乳期miRNA的表达谱和差异作用机制。采集水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织，利用Solexa测序技术构建2个时期miRNAs表达谱，鉴定前体miRNAs、成熟miRNAs和新miRNAs，分析miRNAs的第一偏好性核苷酸和染色体分布，发掘水牛泌乳期和非泌乳期高表达及差异表达miRNAs。结果显示，本研究构建了水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织2个miRNA表达谱，分别获得1...
成熟前后水牛卵母细胞蛋白质组的初步研究
水牛 体外成熟 卵母细胞 蛋白质组
2016/10/31
应用聚丙烯酰胺凝胶电泳联合反相液相色谱-串联质谱（RP-LC-MS/MS）蛋白质组学技术，研究GV期和MII期水牛卵母细胞蛋白质组，以期为揭示水牛卵母细胞体外成熟分子机理、筛选与卵母细胞成熟质量相关蛋白质奠定理论基础。从GV期和MII期水牛卵母细胞中分别鉴定到647和570种蛋白质（FDR<1%）。其中，鉴定相同蛋白质414种；GV期和MII期卵母细胞特有鉴定蛋白质分别为233种和156种。通过谱...
旨在探讨bbu-miR-103-1在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达模式，并预测其靶向调控基因及功能。本研究应用qRT-PCR检测bbu-miR-103-1，在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达。构建bbu-miR-103-1前体表达质粒LpEZX-pre-miR-103-1,并在293T细胞中包装高滴度的慢病毒颗粒，用于感染水牛乳腺上皮细胞实现过表达bbu-miR-103-1，同时应用化学合成的bbu...
本研究旨在检测水牛STAT1基因的单核苷酸多态性（SNP），探究中国水牛多态性位点的群体遗传特征，寻找与产奶性状相关的分子标记。采用PCR和测序法筛选水牛STAT1基因序列的SNPs，以357头水牛为研究对象，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法（MALDI-TOF-MS）对群体进行了基因型检测，运用SAS（9.3）软件一般线性模型（GLM）对STAT1基因型与产奶性状的关联程度进行统计分析。结...
中国农业科学院水牛研究所水牛胚胎移植受体牛场圆满完成项目工程验收（图）
中国农业科学院水牛研究所 水牛胚胎移植 牛场
2014/11/14
2014年10月20日，我所的水牛胚胎移植受体牛场圆满完成了项目工程部分的竣工验收。通过项目，我所新建了一个可饲养良种水牛上千头规模的新型受体牛场，这将成为我所未来建立地中海水牛繁育中心，开展规模化水牛胚胎移植技术中试的一个重要平台。
本研究以水牛卵泡颗粒细胞作为线粒体的来源细胞，初步探讨水牛卵母细胞进行线粒体移植（MIT）后对其发育潜能的影响。试验比较了不同级别水牛卵母细胞mtDNA的拷贝数，并研究了水牛卵母细胞进行MIT后，其后续早期胚胎发育及胚胎线粒体膜电位（ΔΨm）的变化情况。结果显示：一级卵母细胞组的平均mtDNA拷贝数极显著高于二、三级卵母细胞组（（202 101±74 432） vs （118 483±17 028...
水牛YY1基因克隆及其shRNA片段的筛选
水牛YY1基因 shRNA 慢病毒表达载体 基因表达
2014/3/18
本试验旨在克隆水牛阴阳因子1（YY1）基因，并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段。以水牛成纤维细胞cDNA为模板，采用RT-PCR方法，扩增水牛YY1基因CDS序列，将其连接插入到pMD18-T载体中，进行序列测序并分析。采用Xho I和EcoR I双酶切，将水牛YY1基因编码区定向克隆至pEGFP-N1载体中，构建其真核表达载体pYY1-EGFP-N1。设计2条靶向水牛YY...
旨在采用TMT标记结合二维高效液相色谱/串联质谱联用的技术对不同时期水牛睾丸曲精细管的差异蛋白质组进行分析。分别提取不同时期（幼年期、老年期）水牛睾丸曲精细管总蛋白，TMT试剂标记后进行强阳离子交换柱分离多肽、nano LC分离，同时在线连接电喷雾串联Orbitrap质谱进行分析，通过SEQUEST软件搜库并对鉴定的差异蛋白数据进行生物信息学分析。结果表明：共筛选出定量差异倍数≥2倍的差异蛋白89...
沼泽型水牛CYP19A1基因克隆、序列分析及组织表达研究
水牛 CYP19A1 克隆分析 表达模式
2013/11/29
旨在对沼泽型水牛CYP19A1基因进行克隆、生物信息学分析及对其在水牛组织的表达规律进行系统的探索。根据GenBank已公布的牛CYP19A1基因序列，设计特异性引物应用RT-PCR方法扩增克隆获得目的基因片段；应用生物信息学方法，分析和预测了水牛CYP19A1的理化性质、蛋白质二级及三级结构；应用QRT-PCR技术对CYP19A1在水牛组织的表达进行了差异分析。测序结果表明：水牛CYP19A1基...
为研究安徽江淮水牛群体的分子种质特性，本试验测定了江淮水牛2个亚群共82个个体的线粒体Dloop区和细胞色素b基因完整序列，分析了序列遗传多态性及系统进化关系，并结合GenBank中已发表的141条中国水牛Dloop序列，进行了联合分析。结果在Dloop区内共发现核苷酸多态位点91个，组成104个单倍型，其中32个是在江淮水牛中新发现的单倍型。总体mtDNA Dloop区核苷酸多样性为(0...
为研究安徽江淮水牛群体的分子种质特性，本试验测定了江淮水牛2个亚群共82个个体的线粒体Dloop区和细胞色素b基因完整序列，分析了序列遗传多态性及系统进化关系，并结合GenBank中已发表的141条中国水牛Dloop序列，进行了联合分析。结果在Dloop区内共发现核苷酸多态位点91个，组成104个单倍型，其中32个是在江淮水牛中新发现的单倍型。总体mtDNA Dloop区核苷酸多样性为(0...
水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用
伊氏锥虫病 单克隆抗体 胶体金 试纸条
2013/12/3
为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病诊断方法，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒, 标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体，在硝酸纤维素膜上包被纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG, 作为检测带和质控带，然后优化条件，研制成检测伊氏锥虫病的免疫胶体金试纸条。通过交叉试验表明该试纸条与衣原体、弓形虫、旋毛虫、巴贝斯焦虫和大片吸虫无交叉反应。该试纸条最低...