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日前,由中国水产科学研究院珠江水产研究所王庆研究员等发明的“一种罗湖病毒的RT-LAMP检测引物组、试剂盒及方法”获国家发明专利授权,授权专利号:ZL201711282120.5。
柑橘叶斑驳病毒的RT-LAMP检测
柑橘 柑橘叶斑驳病毒 环介导等温核酸扩增技术
2020/12/11
建立了柑橘叶斑驳病毒(citrus leaf blotch virus,CLBV)的RT-LAMP(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification)检测方法,并对其灵敏度和准确性进行验证。根据CLBV的外壳蛋白序列设计引物,筛选出特异性较好的一组引物,进行扩增时间及温度等条件优化。优化后反应体系可在65 ℃条件下,60 mi...
马铃薯卷叶病毒RT-LAMP检测方法的建立
马铃薯卷叶病毒 反转录环介导等温扩增 反转录聚合酶链式扩增 检测
2020/12/4
为建立一种快速准确检测马铃薯卷叶病毒(potato leafroll virus,PLRV)的方法,本研究以PLRV CP(coat protein,CP)基因ORF3保守序列为靶标,建立了PLRV反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测体系,并对建立的RT-LAMP检测体系的特异性、灵敏度、实际应用效果进行评估。结果表明,建立的PLRV RT-LAMP检测方法,在62℃恒温下扩增50 min,...
柑橘鳞皮病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用
柑橘 柑橘鳞皮病毒 RT-LAMP 检测
2019/8/6
根据NCBI数据库柑橘鳞皮病毒(Citrus psorosis virus,CPsV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列设计了4组特异性引物,通过一系列优化,筛选并获得1组特异性引物。以感染CPsV的柑橘叶片总RNA为模板,采用一步法RT-LAMP(One-step reverse transcription loop-mediated isothermal amplificat...
二重荧光RT-LAMP方法鉴别检测口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒
口蹄疫病毒 水泡性口炎病毒 二重荧光RT-LAMP 检测
2018/5/29
口蹄疫和水泡性口炎是牛常见高度急性病毒传染病,在全球范围内广泛存在。本研究旨在建立一种可同时鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测方法。根据口蹄疫病毒(FMDV)3D基因和水泡性口炎病毒(VSV)N基因的保守序列,设计了2套特异性引物,在每条内引物的5'端标记荧光基团,通过扩增产物颜色判断检测结果。优化反应条件,建立了可同时检测口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP...
甜瓜黄斑病毒(MYSV)RT-LAMP快速检测方法的建立
甜瓜黄斑病毒 RT-LAMP 快速检测
2018/5/21
根据甜瓜黄斑病毒(Melon yellow spot virus,MYSV)N基因的保守序列设计3组特异引物对,通过一系列优化,筛选并获得1组特异引物,建立了MYSV的RT-LAMP检测方法。该方法可在62 ~ 64 ℃,45 min内完成对样品的检测,并且能够特异性扩增MYSV,灵敏度为RT-PCR的100倍,特异性强,灵敏度高,适合对MYSV病样快速检测与鉴定。
辣椒黄脉病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
辣椒黄脉病毒 RT-LAMP 快速检测
2017/11/27
辣椒黄脉病毒(Pepper vein yellows virus, PeVYV)是影响世界辣椒生产的重要病毒, 也是广东省辣椒上主要病原病毒之一。本研究根据PeVYV基因组P3蛋白基因序列设计了2对引物, 建立了该病毒的反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop mediated isothermal amplification, RT-LAMP)检测方法。该方法7...
应用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立一种H7亚型和N9亚型禽流感病毒(AIV)可视化快速检测方法。根据GenBank中H7亚型和N9亚型AIV HA和NA基因序列,在其保守区域设计筛选出H7亚型和N9亚型AIV的特异性LAMP引物各一套,优化反应条件,建立能检测H7亚型和N9亚型AIV RT-LAMP方法,并进行特异性和敏感性检验。结果显示,该法用实时浊度仪63 ℃反应1 h,能特...
禽新型黄病毒RTLAMP检测方法的建立
禽新型黄病毒 RTLAMP 检测方法
2012/8/9
根据环介导等温扩增技术(LAMP),建立了一种适用于禽新型黄病毒的逆转录环介导等温扩增(RTLAMP)快速检测方法。根据禽新型黄病毒E蛋白基因序列,在保守区设计了一套针对禽新型黄病毒基因8个区域的6条特异性引物,并对反应条件进行优化。结果表明该方法对NDRV、GPV、MDRV、NDV、ILTV、FPV均无扩增反应,并可通过反应液是否有沉淀或向反应液中加入荧光染料来对结果进行可视化观察; 扩增反应...
猪呼吸与繁殖综合症病毒RT-LAMP检测方法的建立
猪繁殖与呼吸综合征病毒 RT-LAMP 检测
2010/3/16
【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSV N基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70 min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10 ...
猪呼吸与繁殖综合症病毒RT-LAMP检测方法的建立
猪繁殖与呼吸综合征病毒 RT-LAMP 检测
2010/2/1
【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSV N基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70 min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10 ...
可视化的RT-LAMP方法检测禽白血病病毒
禽白血病病毒 环介导等温扩增技术(LAMP) 检测
2013/12/3
本研究旨在建立一种快速检测禽白血病病毒(ALV)的RT-LAMP方法。根据GenBank中ALV序列,在其保守序列区域设计了多套LAMP引物,通过LAMP Real-time Turbidimeter仪对ALV的LAMP引物、反应体系及反应进程进行监测和分析,以评价该方法的特异性和敏感性,并对加入SYBR GreenⅠ肉眼判定与仪器监测结果进行比对。结果表明:建立的RT-LAMP方法在63 ℃水浴...