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研究基因沉默Survivin对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞凋亡、侵袭以及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶 2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）活性的影响。方法：培养视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞，构建Survivin-shRNA载体。按照处理不同分为Survivin-shRNA组、GFP组和CON组。分别检测三组HXO-RB44细胞凋亡指数、细胞侵袭能力以及VEG...
人survivin蛋白的原核表达、纯化及抗原活性鉴定
人survivin蛋白 原核表达 抗原活性鉴定
2013/9/16
构建人肿瘤抗原survivin的原核表达载体, 优化在大肠杆菌中的表达条件, 并对survivin/His融合蛋白进行纯化和抗原活性鉴定。方法 设计针对survivin基因序列的特异引物, 通过聚合酶链式反应（PCR）扩增人survivin全长基因序列（538 bp）克隆至原核表达载体pET28a(+), 构建重组表达载体pET28a-survivin, 并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),...
探讨E-cadherin及Survivin在不同临床病理学类型胃癌中的表达及二者的相关性，分析它们在胃癌发生、浸润及转移中的作用，为胃癌诊治和判断预后提供依据。方法 采用免疫组化法(S-P法)，检测E-cadherin、Survivin在胃癌及癌旁组织中的表达，分析它们与胃癌各临床病理特征之间的关系。结果 (1)胃癌组织中E-cadherin阳性表达率低于癌旁正常黏膜组织，Survivin阳性表达...
Survivin在类风湿关节炎中的表达及意义
类风湿关节炎 多药耐药 存活素
2013/3/12
探讨存活素(survivin)与类风湿关节炎(RA)发生发展的关系,以及与难治性类风湿关节炎(RRA)多药耐药的相关性。方法:按照入组标准收集正常人15 例、RA初诊未治组35例,治疗有效组20及难治组25例。采用免疫细胞化学法检测外周血淋巴细胞上survivin的表达。结果:外周血淋巴细胞中survivin阳性表达率RA初诊未治组明显升高,与正常对照组相比差异有统计学意义(χ2=29.59,P<...
观察非小细胞肺癌(NSCLC)患者痰液中Survivin和Livin蛋白的表达情况以及两者之间的关系，以探讨痰液免疫细胞化学染色在肺癌辅助诊断中的应用。方法 采用改良Saccomanno法收集68例经活检或手术确诊的NSCLC患者的痰液标本，15例肺纤维化(对照组)和10例正常人(对照组)痰液标本，采用免疫细胞化学染色法检测痰液中Survivin和Livin蛋白的表达情况，分析这两种蛋白在NSCL...
探讨FEZ1和survivin在宫颈上皮内瘤变中的表达及其相关性。方法 应用免疫组织化学方法检测93例宫颈上皮内瘤变组织及10例正常宫颈组织中FEZ1、survivin的表达情况。结果 在正常宫颈组织、CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级中，FEZ1的阳性表达率分别为90.0%、67.9%、36.0%、22.5%，survivin分别为10.0%、25.0%、52.0%、57.5%。FEZ1在CIN...
目的研究慢病毒介导生存素基因特异性短发夹状RNA(shRNA) 对子宫内膜异位症异位内膜生长及新生血管形成的影响。方法建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)子宫内膜异位症模型，随机分成单纯接种组、shRNA慢病毒组、空载慢病毒组和空白载体组，每组30只。通过Image-proplus软件测量新生血管面积与鸡胚尿囊膜面积比(VA/CAM) 评价沉默survivin基因对CAM血管生成的影响，TUNEL检测异位...
Survivin shRNA重组慢病毒构建
及对A549细胞增殖的影响
慢病毒 Survivin 短发夹RNA 增殖
2013/12/5
Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein, IAP）家族的成员，在多种肿瘤组织中高度表达而在终末分化细胞中极少表达，因此可以作为癌症治疗的理想靶点。本研究旨在通过构建Survivin基因shRNA的慢病毒质粒并干扰肺癌细胞A549中Survivin的表达，分析其对细胞增殖的影响。方法 设计Survivin干扰靶序列，构建重组质粒；将pLL3.7-...
目的：探讨抗凋亡基因survivin及其异构体和天然互补序列EPR-1在急性白血病（AL）中的表达，以及在AL的发生、预后等方面的意义。 方法： 采用RT-PCR方法检测86例初治AL患者survivin及其异构体survivin-2B、survivin-Ex3、 EPR-1基因的mRNA表达。 结果： （1） 本组AL患者survivin mRNA表达率为79.1%，高于正常对照组（31.3%）...
目的：探讨反义基因治疗与化疗联合应用提高骨肉瘤疗效的可行性及其机制。 方法:通过构建荷骨肉瘤裸鼠模型，采用瘤内注射和腹腔给药方式，以 survivin反义寡核苷酸（ASODN）配合顺铂（DDP）对瘤鼠进行联合干预治疗，并与各单药组进行比较，观测各组裸鼠肿瘤生长情况、评估瘤体病理形态，免疫组织化学法检测瘤组织survivin蛋白表达，DNA末端原位标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞凋亡水平。 结果:...
目的：研究链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠胰腺survivin基因mRNA表达，了解其在胰岛损伤中的作用。 方法： 小剂量多次注射STZ的方法建立糖尿病小鼠模型，每周测定体重及血糖，并采用实时荧光PCR方法检测胰腺survivin基因mRNA表达水平。 结果： 正常BALB/c小鼠胰腺有survivin基因表达。STZ组体重在4周内无明显改变；血糖在第1周即明显升高；survivin表达水平在...
survivin反义寡核苷酸对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用
胰腺癌 survivin 反义寡核苷酸 裸鼠
2009/8/7
目的: 探讨survivin反义寡核苷酸对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用. 方法: 构建胰腺癌荷瘤裸鼠模型, 采用瘤内注射方式, 每只注射survivin反义寡核苷酸(ASODN) 40 g/200 L, 对裸鼠进行干预治疗. 观测裸鼠肿瘤生长情况及瘤体质量、病理形态; 应用RT-PCR检测肿瘤的survivin mRNA变化; 应用caspase-3试剂盒检测caspase-3活性; 免疫组织化学法...
靶向survivin的siRNA对肝癌细胞生物学行为的影响
靶向survivin siRNA 肝癌细胞
2009/7/28
目的: 探讨转入靶向survivin的siRNA对肝癌细胞生物学行为的影响.方法: 设计、合成一对survivin编码基因的反向重复序列，中间间隔9个核苷酸序列，通过定向克隆至载体PSilencer2.1，构建siRNA真核表达载体，经稳定转染HepG2细胞后对转基因后肿瘤细胞的生物学行为进行观察.结果: 测序证实siRNA真核表达载体构建成功. 通过RT-PCR及流式细胞术检测，siRNA在mR...
目的: 克隆人类抗凋亡基因survivin(SVV)，实现SVV基因在大肠杆菌中的高效表达.方法: 提取胃癌细胞系SGC-7901总RNA，RT-PCR扩增人SVV全长cDNA，克隆于载体pGEM-T，酶切、测序鉴定. 将人类SVV基因全长cDNA克隆入原核表达载体pRSET，实现该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达. 结果: 得到人SVV基因全长cDNA，经测序与SVV基因的已知序列相...
目的: 构建Survivin启动子介导自杀基因胞嘧啶脱氨酶(CD)与Survivin Cys84Ala突变体(SurMut)融合基因的重组腺相关病毒质粒(pAM/SurP-CDglySurMut), 探讨其在肿瘤细胞中有效表达融合基因的能力. 方法: PCR扩增E.coli CD基因和带有甘氨酸(gly)连接体的Survivin突变体片段, 亚克隆至具有Survivin启动子的腺相关病毒载体pAM...