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目的 以肾癌细胞为研究对象,探索超声靶向破坏微泡(UTMD)技术对重组腺相关病毒(rAAV)转染率的影响。方法 应用不同感染复数(MOI)的rAAV2转染786-0细胞观察转染率。用不同条件UTMD预辐照rAAV2,观察病毒活性。以不同条件UTMD联合rAAV2转染人肾透明细胞癌(786-0)细胞,测定转染率及细胞生存率,RT-PCR检测细胞内病毒载体基因拷贝数。结果 1×104~1×106 MO...
六年血流感染病原菌分布及耐药性分析
血流感染 血培养 病原菌 耐药性
2012/6/6
对我院6年血流感染病原菌分布及耐药性进行研究，为血流感染的正确诊断和治疗提供依据。方法 血培养采用BACTEC自动化血培养仪，菌株鉴定使用VITEK-32细菌鉴定系统或API鉴定系统。结果 6年共分离657株细菌，分离菌中革兰阳性菌367株(占5586%)，革兰阴性菌279株(占4247%)，真菌11株(占167%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌占金黄色葡萄球菌5042%，耐甲氧西林凝固酶阴性...
采用免疫亲和柱净化,结合柱后光化学衍生化的高效液相色谱-荧光检测器建立同步检测常用中药材及染菌中药制剂中间体中的黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的方法。 方法: 采用免疫亲和柱净化洗脱结合柱后光化学衍生手段,建立黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的分析方法,并分别对14种中药材及染菌中药制剂中间体进行检测。 结果: 黄曲霉毒素B2和G2, B1和G1分别在0.15~6.0和0.5~20.0 ng·m...
增强绿色荧光蛋白标记腺病毒、腺相关病毒体内转染新西兰兔软骨细胞效果比较
软骨细胞 腺病毒科 转染
2012/6/5
通过绿色荧光蛋白标记，比较腺病毒、腺相关病毒对新西兰兔膝关节软骨的转染效果。方法 制作含增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因的5型腺病毒重组体(rAd5)和2型腺相关病毒重组体(rAAV2)。分别在正常新西兰兔和骨关节炎动物模型的新西兰兔膝关节腔内注射rAd5和rAAV2，分别在转染后1、3、5周处死，肉眼观察关节腔内软骨及关节滑液改变，抽取关节液测量关节液中白细胞数目，计算关节软骨中软骨细胞的转染率...
超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染
超声 微泡 造影剂 基因转移技术
2014/5/14
探讨超声介导自制阳离子微泡破坏、增强基因转染的效果,并与普通脂质微泡对比,寻找一种更可靠、完善的基因载体工具。方法 采用水浴机械震荡法,加入DC-胆固醇制备阳离子微泡,观察其物理特性并检测其体外载基因能力。将微泡和质粒DNA加入人脐静脉血管内皮细胞后分为6组,观测不同微泡浓度对细胞存活率的影响,应用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测基因转染率,MTT法分析细胞存活率。结果 自制...
超声靶向破坏微泡介导腺相关病毒为载体的基因转染
腺病毒科 基因转移技术 超声学 微泡
2014/5/16
腺相关病毒(AAV)是相对理想的基因治疗载体,但其转染效率低。超声靶向破坏微泡(UTMD)通过声孔效应、内吞作用和化学作用促进细胞摄取,是简单、易于操作、安全的提高基因转染率的方法。目前UTMD介导AAV为载体的基因转染已用于研究心脏、眼睛和肝脏的基因治疗。本文对AAV载体的转染特点、UTMD介导AAV为载体的基因转染机制及其应用进行综述。
转染PDCD5基因促进顺铂诱导前列腺癌细胞的凋亡作用
顺铂 细胞程序性死亡基因5 前列腺癌 细胞凋亡
2013/12/20
探讨过表达细胞程序性死亡基因5（PDCD5）对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法CCK-8法检测顺铂处理DU145细胞后对细胞生长增殖的影响；构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞系；Annexin V-FITC﹠PI 双染法检测细胞的凋亡率、电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化；Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果顺铂对DU145细胞的...
扶正解毒颗粒对染镍大鼠肾组织核因子-κB活化的影响
扶正解毒颗粒 硫酸镍 肾脏 核因子-κ B
2012/4/10
研究中药扶正解毒颗粒(FJG)对硫酸镍(NiSO4)染毒大鼠肾组织核因子-κB (NF-κB)活化的影响。方法: 50只Wistar大鼠采用NiSO4 2.5 mg ·kg-1 ip(连续7 d,此后间日1次)制备肾损伤模型,随机分为NiSO4组(模型组)、 FJG高、中、低剂量组(分别为20,10,5 g ·kg-1 ·d-1),二硫基丁二酸(DMSA),50 mg ·kg-1 ·d-1)组。另...
探讨急性染锰对大鼠学习记忆能力的影响及牛磺酸的干预作用。方法 (1) 牛磺酸预防实验: 染锰组大鼠每日ip给予MnCl2·4H2O 15 mg·kg-1, 连续4周。染锰+牛磺酸预防组大鼠染锰的同时ip牛磺酸200 mg·kg-1，持续4周。(2) 牛磺酸治疗实验: 每日ip给予MnCl2·4H2O 15 mg·kg-1染锰, 4周后再ip牛磺酸200 mg·kg-1，持续4周。水迷宫实验检测逃避...
甲醛急性染毒对性成熟期雄性大鼠血清睾酮水平及性行为的影响
甲醛 睾酮 性行为 动物 大鼠 Sprague-Dawley
2012/5/29
探讨甲醛急性染毒对性成熟期雄性大鼠血清睾酮水平和性行为的影响。方法 选用性成熟期健康SD雄性大鼠48只，随机分为甲醛染毒高(10 mg•kg－1•d－1)、中(1 mg•kg－1•d－1)、低(0.1 mg•kg－1•d－1)剂量和对照组4组。腹腔注射染毒3 d和7 d后，分别观察雄性大鼠的扑捉潜伏期(CLP)和60 min内...
INF-γ基因转染肺泡巨噬细胞抗肿瘤活性的研究
肺肿瘤 肺泡巨噬细胞 基因转染
2013/12/6
活化的肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage,AM）具有抗肿瘤功能，γ干扰素（interferon-γ,INF-γ）是巨噬细胞的活化因子之一，其与巨噬细胞体外共同培养可增强巨噬细胞的免疫功能。本研究旨在了解人INF-γ基因体外转染肺癌患者的AM后对其抗肿瘤功能的影响。方法 经肺泡灌洗获AM，分离纯化，以INF-γ基因转染AM，以RT-PCR方法和ELISA方法检测人INF-γ基因的成...
探讨活血益气方及其拆方含药血清对含有血管内皮生长因子(VEGF)165的重组质粒pcDNA3.1-VEGF165转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌基质金属蛋白酶(MMP)2,9的影响。 方法: 构建pcDNA3.1-VEGF165重组质粒,采用Fugene HD将质粒瞬时转染至HUVEC中。制备活血益气方及其拆方含药大鼠血清、生理盐水正常血清,以5%药物血清作用于转染后的HUVEC,Weste...
将体外转录的癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）mRNA转染入成熟树突状细胞（dendritic cell，DCs），观察其体外诱导的特异性抗肿瘤作用。方法: GM-CSF、IL-4、TNF-α体外诱导成熟DCs并用流式鉴定。构建pcDNA3.1-CEA载体，体外转录为CEA mRNA，电穿孔法将CEA mRNA转染入DCs。流式细胞术检测转染后DCs中CEA蛋白的...
观察Bcl-2shRNA稳定转染联合γ线照射对胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响。方法 构建针对Bcl-2基因的干扰质粒pGPH1/GFP/Neo，经脂质体介导转染SGC7901细胞，G418筛选稳定表达的细胞株，γ线照射后形成4组细胞,分别命名为SGC-7901(A组)、照射/SGC-7901(B组)、Bcl-2shRNA/SGC-7901(C组)、照射/ Bcl-2shRNA/SGC-...