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目的：探讨缺氧、复氧条件下，低氧反应元件(HRE)作为氧条件基因表达控制开关，对心肌细胞转染rAAV-HRE9-hVEGF165基因表达的调控作用。方法:分离新生SD大鼠心肌细胞,采用无血清培养,将在HEK293T细胞进行包装后获得的腺相关病毒转染培养的心肌细胞。实验共分为8组：Ⅰ组（空白对照组）：常氧培养 24 h（氧浓度21％）；Ⅱ组（缺氧对照组）：常氧培养16 h，缺氧8 h（氧浓度1％）...
血管内皮生长因子基因转染的心肌细胞移植对心肌梗死大鼠心功能的影响
心肌梗死 心肌细胞 内皮生长因子 移植
2009/8/18
目的：探讨腺病毒介导血管内皮生长因子165基因（AdVEGF165）转染乳鼠心肌细胞后血管内皮生长因子（VEGF）的表达及移植于大鼠急性心肌梗死（MI）模型后对心功能的影响。方法:体外培养新生大鼠心室肌细胞、标记BrdU、共培养法转染AdVEGF165基因；收集培养液上清，ELISA法检测转染细胞VEGF的表达。结扎同种大鼠前降支建立心肌梗死模型，4周后将心肌梗死大鼠随机分为4组，分别注射移植...
目的: 把蛋白质芯片和SELDI质谱技术应用于金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B, SEB)染毒小鼠血清蛋白质组研究, 分析染毒小鼠血清蛋白质组的变化. 方法: 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术和弱阳离子交换蛋白质芯片检测染毒小鼠血清蛋白质的变化, 使用PBSII-C型蛋白质芯片阅读机读取数据, 获得的结果采用Ciphergen公司的Bioma...
目的: 探讨表达甲胎蛋白抗原的重组腺相关病毒rAAV-AFP转染对人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)免疫刺激功能的影响. 方法: 用rAAV-AFP转染新分离的DC; 苔盼蓝拒染法检测每天的活细胞比率; 流式细胞仪检测DC表面分子CD80, CD86, CD83, CD40, CD1a, HLA-DR及AFP的表达; 并用3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激自体淋巴细胞增殖能力; MTT法检...
Ad-p27mt转染重组腺病毒治疗裸鼠内人胃癌的分子机制
胃癌 人突变基因p27 细胞凋亡
2009/8/13
目的: 研究Ad-p27mt转染重组腺病毒对人胃癌细胞凋亡的作用及机制. 方法: Ad-p27mt转染重组腺病毒导入胃癌细胞株SGC-7901内; 流式细胞仪检测凋亡染色体亚二倍体峰值, 了解Ad-p27mt对人胃癌组织凋亡的作用; TUNEL法检测DNA片断, 在Ad-p27mt组和Ad-LacZ组中分析细胞的凋亡. 结果: Ad-p27mt成功转入人胃癌细胞SGC-7901内, 转化率达100...
转染VEGF165的大鼠血管内皮细胞与胰岛共移植对糖尿病大鼠的治疗作用
2009/8/10
目的: 探讨VEGF165转染大鼠血管内皮细胞诱导移植胰岛再血管化及对功能的影响. 方法: 受体糖尿病大鼠随机分为3组, 对照组于肾被膜下移植300当量(1当量相当于1个直径为150 mum的胰岛)胰岛, 转染组和内皮细胞组分别加入1×10(6)转染质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的血管内皮细胞和正常血管内皮细胞. 移植后监测血糖及血清胰岛素水平. 术后10 d行静脉糖耐量实验(IVGT...
hBDNF-GFP基因转染神经干细胞后hBDNF的表达及生物学特性研究。
转染试剂及幽门螺杆菌对AGS细胞形态的影响
幽门螺杆菌 AGS细胞 转染试剂 细胞形态
2009/8/7
目的: 探讨不同的转染试剂对AGS细胞形态的影响, 观察这些转染试剂能否像幽门螺杆菌那样引起AGS细胞蜂鸟状改变.方法: 用多聚阳离子转染试剂(多聚乙酰亚胺、梭华-S o f a s t)和改良的脂类转染试剂(Effectene Transfection Reagent)分别转染AGS细胞, 观察细胞形态的变化. 用幽门螺杆菌26695菌株攻击AGS细胞, 观察细胞形态的变化并与经转染试剂作用的细...
在体转染GSK-3β引起tau蛋白在PHF-1位点的过度磷酸化
糖原合成酶激酶 tau蛋白质类 磷酸化
2009/8/6
目的：探讨在体转染GSK-3β对tau蛋白在PHF-1位点磷酸化的影响。 方法： 21只大鼠随机分为GSK-3β转染组、空载体组和空白对照组3组：0.1 μg/3 μL GSK-3β-HA质粒和空载体分别注射入大鼠大脑，对照组大鼠不作处理，应用免疫印迹和免疫组织化学检测GSK-3β的表达，并应用磷酸化位点特异性抗体PHF-1检测tau蛋白的磷酸化水平。 结果： 转染48 h后，GSK-3β-HA表...
目的: 我们已经报道锰型超氧化物岐化酶(MnSOD)高表达可明显抑制SGC7901胃癌细胞的增殖，本研究拟进一步探索其中所涉及的分子机制. 方法: 利用DCFH-DA荧光染色方法检测正义、反义及空载SGC7901胃癌细胞株内的活性氧水平.透射电镜下观察肿瘤细胞形态及细胞器结构改变.RT-PCR方法检测三者缺氧诱导因子HIF-1alpha的表达. 结果: 正义MnSOD-7901胃癌细胞胞内ROS下...
目的: 探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响. 方法: 根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组，空载体转染组，未转染组.应用PCR检测外源性p15基因，Western blot方法检测转染细胞的P15蛋白变化;流式细胞仪分析细胞周期变化，应用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p15基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响...
目的: 运用SELDI蛋白质芯片技术检测体外培养的肝癌细胞株(HepG2)与转染乙肝病毒的肝癌细胞株(HepG2.2.15)蛋白质的差异表达，从而为进一步研究肝癌的发病机制奠定基础. 方法: 常规培养上述两种细胞，细胞状态良好时收集细胞，裂解细胞后采用 SELDI-TOF-MS技术用WCX2芯片检测HepG2、HepG2.2.15蛋白质组学的差异. 结果: WCX2芯片共捕获91个蛋白，其中Hep...
目的: 应用基因芯片技术，检测丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式激活基因1(NS3TP1)的表达对肝母细胞瘤细胞HepG2基因表达谱的影响，进一步NS3TP1蛋白可能的分子生物学功能.方法: 设计并合成NS3TP1基因序列特异性的引物，应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS3TP1蛋白编码基因片段，以常规的分子生物学技术构建表达载体pcDNA3.1(-)-NS3TP1. 以脂质体技术...
反义IGF-Ⅰ寡核苷酸转染对人肝癌细胞生长的抑制作用
反义IGF-Ⅰ寡核苷酸 转染 人 肝癌细胞
2009/7/29
目的: 利用反义核酸技术，研究体外胰岛素样生长因子-I(IGF-I)反义寡核苷酸转染对肝癌细胞增生、分化及凋亡的影响，探讨寡核苷酸转染治疗肝癌的可行性.方法: 合成针对IGF-I的寡核苷酸片段，利用脂质体包裹反义IGF-I寡核苷酸片段瞬时转染人肝癌细胞系BEL-7402细胞，MTT法检测细胞增生; 放免法检测培养细胞上清中AFP，CEA的分泌量; 免疫组化法检测转染细胞AFP，PCNA表达的变化;...