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类乌齐牦牛全基因组RNA编辑位点预测及剖析
类乌齐牦牛 RNA编辑位点 SPRINT JACUSA
2021/3/8
为揭示牦牛不同组织间受RNA编辑导致转录产物发生的差异变化，进而为牦牛的组织分化、系统遗传调控等研究提供候选基因。本研究以3头4.5岁类乌齐母牦牛的大脑、小脑、臀部脂肪以及肌肉组织作为试验材料，通过Illumina 4000测序平台对各组织表达产物进行扫描，利用SPRINT和JACUSA筛选差异的RNA编辑位点，分析RNA编辑位点的分类、注释以及变异风险评估等。结果发现了总计24 784个RNA编...
蓝舌病在全球的分布概况
蓝舌病 疫病监测 病毒分离 疫病流行
2021/5/8
蓝舌病为OIE规定的需通报疫病，我国将其列为一类动物疫病。该病已经给全球大部分流行地区造成巨大经济损失。我国于1979年首次证明该病存在，且在我国流行初期即造成大量易感动物死亡，给我国畜牧业带来了重大经济损失。但蓝舌病在我国仍属冷门研究方向，我国到底分离鉴定出多少个血清型的蓝舌病病毒，该病在我国的分布范围到底有多广？许多畜牧兽医工作者对这些问题并不是非常清楚。特别是在近年来鲜有蓝舌病引起动物发病死...
本研究旨在探究褪黑素（MT）对脂多糖（LPS）致大鼠海马炎性损伤的保护作用。选取40只4周龄健康雄性SD大鼠，随机分为4组：空白组（CON组）、模型组（LPS组）、褪黑素干预组（LPS+MT组）及褪黑素组（MT组）。通过腹腔注射的方式给予大鼠10 mg·kg-1MT和/或10 mg·kg-1LPS，4 h后，采用旷场试验对各组大鼠进行行为学测试；试验结束称大鼠体重，解剖取海马称重并计算海马体系数；...
为研究沙门菌引致IPEC-J2损伤的分子机制，试验用沙门菌刺激IPEC-J2，在特定时间收集细胞及其培养上清液，采用荧光定量PCR或ELISA检测细胞紧密连接蛋白、炎症反应相关蛋白和细胞增殖相关蛋白的表达以及乳酸脱氢酶（LDH）含量，以确定该沙门菌能够引起IPEC-J2损伤，并进一步采用NF-κB抑制剂和小干扰RNA预处理IPEC-J2，分析了NF-κB/β-catenin信号通路在沙门菌引起IP...
本研究旨在建立针对小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）H蛋白抗体的iELISA检测方法。以筛选的H蛋白B细胞表位为基础，选择反应原性较好的4个抗原表位肽串联后合成作为包被抗原，优化各步反应条件及筛选各种缓冲液，并确定检测临界值。经优化后，多表位抗原肽的最佳包被量为1.5×10-6 μg·孔-1，血清临界稀释度为1：100，酶标二抗最佳稀释度为...
肝细胞损伤是围产期奶牛脂肪肝病的主要病理特征。本研究旨在探讨甘草酸单铵盐（monoammonium-glycyrrhizinate，MAG）对油酸钠诱导奶牛原代肝细胞损伤的影响。试验以体外培养的肝细胞为研究对象，根据处理不同分为对照组（未做处理的原代肝细胞）和试验组（模型组、MAG组：分别添加0、0.25 mg·L-1的MAG对原代肝细胞预处理12 h，再使用浓度为0.25 mmol·L-1的油酸...
旨在分析禽腺病毒血清4型（FAdV-4）感染鸡组织中NLRP3基因的转录水平，本研究设计鸡NLRP3特异性引物，利用RT-PCR扩增NLRP3基因180 bp片段并克隆至pMD-18T载体，制备重组质粒pMD-18T-NLRP3。以pMD-18T-NLRP3质粒作为标准品进行荧光定量PCR并建立标准曲线。通过反应条件优化，成功建立了检测NLRP3基因的实时荧光定量PCR方法，并利用该方法对致病性F...
1种检测弓形虫急性感染的夹心ELISA方法
弓形虫急性感染 GRA1单克隆抗体 循环抗原 双抗体夹心ELISA
2021/3/8
弓形虫（Toxoplasma gondii）是一种人畜共患机会性致病原虫，其急性感染可导致宿主产生明显的临床症状和严重的病理损伤。弓形虫致密颗粒蛋白1（dense granuleprotein 1，GRA1）是一种良好的诊断抗原，也是弓形虫急性感染的标志物循环抗原（circulating antigen，CAg）的重要组分。本研究利用TgGRA1单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA方法，为急性弓形虫...
旨在探究SRD5A2基因对山羊产羔性状相关基因表达的影响。本研究选择健康的（2~3岁）黔北麻羊经产母羊3只，体重约32 kg，采集卵巢组织并成功培养卵巢颗粒细胞。通过在线软件设计SRD5A2基因的4对siRNA干扰序列和1对阴性对照序列，连接pGPH1/GFP/Neo载体后，将构建成功的干扰载体转染至黔北麻羊卵巢颗粒细胞。利用qRT-PCR方法筛选出干扰效率最佳的载体，检测其对SRD5A2基因表达...
奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌免疫逃避机制研究进展
奶牛乳腺炎 金黄色葡萄球菌 免疫逃避
2021/3/8
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，SA）型奶牛乳腺炎是一种较难控制的慢性、亚临床型传染病，给奶牛养殖业带来巨大的经济损失。多种SA免疫逃避机制在乳腺炎发生、发展过程中起重要作用，且SA的免疫逃避机制多与菌体毒力因子相关。本文对近年研究的奶牛乳腺炎SA的免疫逃避机制进行了综述，以期为SA型奶牛乳腺炎的防治研究提供参考。
旨在获得猪CCAR1基因的完整CDS序列，研究其亚细胞定位和表达特性，探究其对细胞增殖的影响和作用机制。本研究以1日龄马身猪肾组织cDNA为模板，采用RT-PCR技术分段扩增猪CCAR1基因的CDS区，通过测序和序列拼接获得完整CDS区；采用细胞免疫荧光技术检测CCAR1在PK15细胞中的定位；采用qRT-PCR技术检测猪CCAR1基因的时空表达规律；采用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除PK...
旨在探究miR-17-3p是否可以通过靶向KCTD15调节延边黄牛前体脂肪细胞的分化。本研究使用生物信息学软件鉴定miR-17-3p的同源性，预测miR-17-3p的靶基因；通过在延边黄牛的前体脂肪细胞中转染miR-17-3p mimic或miR-17-3p inhibitor及阴性对照实现细胞内miR-17-3p过表达或抑制表达；采用双荧光素酶报告基因检测系统确定miR-17-3p与KCTD15...
1种检测新城疫病毒的微滴式数字PCR方法
新城疫病毒 数字PCR 检测方法
2021/3/9
本研究旨在构建一种新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）的微滴式数字PCR方法（droplet digital PCR，ddPCR）。以NDV F基因为靶基因，选取保守区域设计引物和探针，构建了NDV ddPCR。对ddPCR反应引物和探针浓度、退火温度进行了优化，并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行测定。试验结果表明，ddPCR的最佳引物和探针浓度分别为900和2...
旨在探究叶酸补饲对隐性乳房炎奶牛免疫及产奶相关性状的影响和相关分子机制，为隐性乳房炎奶牛补充叶酸奠定理论依据和实践基础。本试验基于北京郊区某牧场的中国荷斯坦奶牛群体，根据胎次、体重以及体细胞数（连续2个月SCC>500×103个·mL-1）选择29头泌乳牛作为研究对象，分为补饲组（n=18）和对照组（n=11）。连续14 d对补饲组进行包被叶酸（每天120 mg/500 kg）饲喂，对照组不做任何...